神经板边界形成于脊椎动物原肠胚神经板和表皮的交界处,发育为脊椎动物特有的神经嵴和基板。神经嵴参与颅面软骨、周围神经系统、心脏流出道以及色素细胞等的发育过程,基板主要参与脊椎动物头部感觉器官的形成。虽然神经板边界发育信号网络的研究已经有了重要的进展,但是具体机制仍然需要探索。
Nkx6.3是毛炳宇课题组博士生张祖明、石宇、赵树华和李杰晶鉴定的一个神经板边界特化基因。由于Nkx6.3 mRNA的丰度很低,该研究组将实时定量PCR技术与爪蛙胚胎的精细切割结合起来确定了Nkx6.3的表达模式:Nkx6.3表达于表皮、基板和神经嵴,在神经板中几乎没有表达;通过同样的技术我们发现Nkx6.3表达于外胚层。
通过显微注射针对Nkx6.3的反义Morpholino敲低Nkx6.3的蛋白质合成,原位杂交的结果显示神经板边界特化基因Zic1、Pax3和Msx1的表达受到抑制,同时神经嵴的发育也受到严重影响,而同样来自于神经板边界的基板几乎不受Nkx6.3敲低的影响。过表达Nkx6.3,神经板边界的特化基因除了Pax3,都在一定程度上受到了Nkx6.3的诱导,而神经嵴和基板的发育都受到了抑制,同样受到Nkx6.3过表达诱导的基因还有调控神经嵴发育的上游信号Wnt8。
在动物帽中我们发现Nkx6.3可以诱导神经嵴、神经板边界特化基因以及Wnt8 mRNA的转录,这种诱导能力受到转录因子Dlx3的拮抗,而Dlx3的转录受到Nkx6.3的抑制。之前有文献报道Dlx3在神经板边界形成中有重要的作用。我们推测Nkx6.3和Dlx3在神经板边界的相互作用影响了神经板边界及神经嵴的发育。
该研究成果已在线发表于PLOS ONE (http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0115165)。